慢病毒滴度快速檢測卡 說明書

  本產品是采用膠體金免疫層析技術快速檢測分泌到慢病毒包裝上清中的游離囊蛋白P24，以此作為一個靈敏的、間接的替代指標來顯示病毒產量的檢測卡，通過對囊蛋白 P24 的檢測，能快速確定包裝液中的慢病毒滴度是否已經達到收獲需要。該方法僅需要 5~10min 即可得到結果，與傳統轉染方法需要花費2-3天相比，具有明顯優勢。

產品性質

關于慢病毒滴度

一個慢病毒顆粒（Lentiviral Particle, LP）中約有 2000 個 P24 蛋白分子，用以下公式可以計算慢病毒載體的顆粒數（LP）：

一個 LP 相當于：2000×24×10^3/(6×10^23)g of P24=8×10^-5 pg of P24；或者說，1ng P24=1.25×10^7 LPs（≈1.25×10^4-5 TU**）

正常情況下，每 100-1000 LPs 中會有 1 個具有感染活性的病毒載體，即 1 TU（Transducing Unit）。

注意：上述公式計算得到的 LP 值是理論值，檢測樣品中含有的游離的 P24 蛋白可能會使該值偏高。

提示：通常上清中病毒含量需要超過 10^6 TU/ml，才能確保濃縮純化后得到足夠濃度的慢病毒載體（一般能濃縮 150 倍左右）。

本法給出的是檢測線（T 線）強度與功能滴度（Infectious Unit/mL, IFU/mL 或 Transduction Unit/mL, TU/mL）而非物理滴度（Viral Particle/mL, VP/mL）的相關性。這一相關性與病毒所轉染的細胞有關。例如，上圖中，用 3 倍連續稀釋的包裝上清轉染 HEK293 細胞。72 小時后，在熒光顯微鏡下觀察表達 ZsGreen1 的細胞，并用流式細胞儀測定HEK293 細胞的轉染率，得到功能滴100µL 滴度為 2 10 6 IFU/ml 的包裝上清加到樣品孔中，10 分鐘后顯深紅色“T 線"。